人絨毛膜癌細胞 (JEG-3)
細胞介紹：
這是一株超三倍體人類細胞株。其典型染色體數(shù)為71，發(fā)生率為34%，多倍體率為2_6%。
 
細胞培養(yǎng)步驟：
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1.準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHC031.5g/L，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
 
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入lmL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

 
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
 
人絨毛膜癌細胞 (JEG-3)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的 培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng) 基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

 
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO 至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每lml的數(shù)量分配到凍存管 中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

 
注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們電聯(lián)。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

  
細胞特性：
1)來源：絨毛膜癌
2)形態(tài)：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
 
人絨毛膜癌細胞 (JEG-3)細胞接受后的處理：
1.收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉秒娐?lián)。
細胞用途：僅供使用。